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植物線(xiàn)粒體呼吸鏈復合體Ⅱ(MRCCⅡ)ELISA試劑盒-活性

更新時(shí)間:2022-08-30

簡(jiǎn)要描述:

【預期用途】
僅供科研使用,本試劑盒用于測定相關(guān)樣本中植物線(xiàn)粒體呼吸鏈復合體Ⅱ(MRCCⅡ)ELISA試劑盒-活性含量。

型號:96T/HB459X-Pt點(diǎn)擊量:2205

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【樣本要求】


1.樣本類(lèi)型和采集


血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置0.5-2小時(shí)或4℃過(guò)夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于僅供科研使用,不得用于臨床診斷。-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。


血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會(huì )影響測量結果),稱(chēng)重后將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實(shí)驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。細胞裂解液: 吸棄培養液,用 PBS(0.01 M,pH 7.4)將細胞洗一遍。用細胞刮刮下細胞(不能用胰酶和 EDTA 處理),加入 2-5mL PBS(0.01 M,pH 7.4)。懸浮細胞可省略。收集細胞懸液,4℃1000×g 離心 10min,棄去培養基,用預冷的 PBS 潤洗 3 次。加入適量的預冷 PBS 或非變性細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞,通常 6 孔板一個(gè)孔的細胞量需要 150-250μL PBS 重懸。 將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復凍融 3 次,使細胞充分裂解,也可將樣品進(jìn)行超聲破碎,以達到裂解的目的。4℃ 10000×g 離心 10min,除去細胞碎片,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。.樣本保存和穩定性樣本在 2-8℃條件下,可以?xún)Υ?72h,在- 20℃或-80℃可以?xún)Υ? 個(gè)月及以上。樣本收集后,不是一次檢測完,請按一次用量分裝凍存,避免反復凍融


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